1、问题：如果样品有背景颜色，如何进行实验，如何判断结果？
解答：将样品留取100ml不加入酶底物法培养基做阴性对照，检测结果只要比原样品颜色深，即可认为是阳性。
2、问题：比色盘如何保存，比色盘内是否有生物存在？
解答：1）比色盘保存条件：2-30摄氏度避光保存
2）比色盘内为缓冲物质以及ONP和4-MU，并非微生物。
3、问题：酶底物法培养基试剂的pH范围是多少？
解答：酶底物法培养基的pH范围是7.0-7.6
4、问题：酶底物法培养基可以检测的样品的pH范围是多少？
解答：酶底物法培养基可以检测的样品的pH范围是4.5-10.5。
5、问题：如何判断酶底物法培养基试剂是否有效，应该如何保存以及运输酶底物法培养基？
解答：1）保质期内的试剂应该是白色或灰白色，能够自由流动的颗粒物
2）保存条件：2-30摄氏度避光保存
3）建议客户放入自封袋然后避光保存
6、问题：如果培养24小时，与比色盘相比，颜色不确定，如何判读？
解答：24小时培养后，如果颜色不能确定，请继续培养4小时（注意不要超过28小时）然后对比颜色，如果颜色比比色盘浅，则为阴性。
7、问题：封口过程中存在气泡或者有的孔无液体是否影响结果判读？
解答：不影响，酶底物法培养基检测结果是经过统计分析得到的。
8、问题：酶底物法培养基试剂中是否含有有毒物质？
解答：无毒
9、问题：酶底物法培养基检测限是多少？
解答：酶底物法培养基最低能检测出的大肠菌群和大肠埃希氏菌数为1个/100mL。
10、问题：阳性比色盘的作用
解答：1）准确判断检测结果
2）黄色大于等于阳性比色盘视为总大肠菌群或粪大肠菌群阳性
3）黄色或荧光大于等于阳性比色盘视为大肠埃希氏菌阳性
4）保质期为12个月，注意更换
5）黑暗避光下保存
11、问题：酶底物法培养基检测原理
解答：1）酶底物法培养基同时检测总大肠菌群或粪大肠菌群和大肠埃希氏菌。其中两种营养指示剂ONPG和MUG是酶底物法培养基试剂的主要成分。它们分别可以被大肠菌群的β-半乳糖苷酶和大肠埃希氏菌的β-葡糖醛酸梅分解代谢。
2）如果总大肠菌群或粪大肠菌群利用酶底物法培养基试剂生长，它们的β-半乳糖苷酶就会分解代谢ONPG，使样品从无色变为黄色。
3）大肠埃希氏菌利用其β-葡糖醛酸酶分解代谢MUG产生荧光。因为大多数的非目标菌都不含有这种酶，所以它们不会生长或造成干扰。
4）极少量的可以产生这种酶的非目标菌，也会被酶底物法培养基试剂特殊配方的抑制剂选择性的抑制生长。
12、问题：各菌种之间的关系
解答：总大肠菌群＞粪大肠菌群（耐热大肠菌群）＞大肠埃希氏菌（大肠杆菌）
13、问题：机器出厂时显示屏上显示的数字为何不是零
解答：因为机器出厂时工人师傅为了保证机器质量，会使用定量盘来回测试机器。所以计数结果初始值不为零。
14、问题：定量瓶里的颗粒物是什么？
解答：定量瓶里的颗粒物是硫代硫酸钠。
15、问题：如果取样瓶中的硫代硫酸钠为液滴状而不是粉末状，是否说明取样瓶被污染？
解答：不能。硫代硫酸钠是易熔的，它的熔点较低（熔点48℃或118°F）。如果发现取样瓶中的硫代硫酸钠为液滴状，可能是因为运输中温度升高导致其熔解。但是无论是液态的硫代硫酸钠还是粉末状的硫代硫酸钠，其化学本质未发生变化。这样的取样瓶仍然是无菌的，此情况不影响产品的性能。
16、问题：取样瓶中的硫代硫酸钠含量是多少？如果样品中余氯含量超出检测范围，应如何操作？
解答：取样瓶中硫代硫酸钠为10-35mg可以中和15mg/L的余氯
17、问题：如何进行对比实验？
解答：1）同一水样
2）同一稀释倍数
3）单一因素
4）最小样本量30组进行统计分析
18、问题：如何处理阳性样品？
解答：采用耐高温处理垃圾袋进行高压灭菌后丢弃即可。操作步骤如下：
1）将阳性的定量盘放入垃圾袋中，每袋可放入30个盘子。
2）将垃圾袋扎好（不能密封）。
3）放入高温高压灭菌锅处理即可。
19、问题：实验中对同一样品选择了多个稀释度，如何选择合适的稀释度？
解答：对于未知水样，进行了多个梯度的稀释一般情况2-3个，并进行检测，选择结果在30-300MPN的稀释度。
1）不同稀释度的选择及报告方法
a、首先选择平均菌落数在30-300之间者进行计算，若具有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1中实例1）
b、若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30-300之间，则视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数（如表1中实例2）。若大于2则报告其中稀释度较小的菌落总数（如表1中实例3）。若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落总数（见表1中实例4）。
c、若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（如表1中实例5）
d、若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（如表1中实例6）
e、若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，则应以最接近30或300的平均菌落数稀乘以稀释倍数报告之（如表1中实例7）
f、若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告之。
备注：以上结果报告方法详见GB/T5750.12-2006。
