工作原理
将特异性抗体通过共价键固定在惰性载体(如琼脂糖凝胶)上,装填成柱。
当含有目标化合物的样品通过柱子时,目标物(抗原)与柱内抗体特异性结合,被"抓住"留在柱上;其他无关物质则直接流出。
先用淋洗液洗去杂质,再用洗脱液(如甲醇)将目标物从抗体上解离下来,收集洗脱液即可用于后续检测。
基本组成
柱管:常见 1 mL 和 3 mL 两种规格
固定相:琼脂糖凝胶等惰性载体
特异性抗体:共价偶联在凝胶上,是反应的关键部分
保护液:缓冲溶液,保持凝胶润湿
筛板:孔径约 20 μm
上下顶盖:防止保护液流失
操作流程
柱子预处理:恢复至室温,放出保护液
上样:将处理好的样品提取液缓慢通过柱子(流速约 1~2 滴/秒)
淋洗:用蒸馏水淋洗,去除非目标杂质
洗脱:用甲醇等洗脱液将目标物洗脱下来,收集洗脱液供 HPLC、GC-MS 等仪器分析
主要特点
特异性高:利用单克隆抗体,能精准识别目标物
纯化效率高:单次操作即可获得 1000~10000 倍的纯化效果
操作简便快速:整个净化过程约 30 分钟
回收率高:添加回收率可达 80%~120%
检测限极低:可达 10⁻¹² 数量级,适合痕量分析
应用领域
食品安全检测:黄曲霉毒素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素等真菌毒素的检测
兽药残留检测:猪肉中的氯霉素、磺胺类药物,血浆中的克仑特罗等
生物制药:抗体、重组蛋白、激素等的分离纯化
环境监测:二噁英等有害物质的检测
营养品检测:乳铁蛋白、维生素 B12、免疫球蛋白等



